Инфекционные заболевания — одна из самых существенных угроз для успешной аквакультуры. В данной лекции Владимира Воронина, д. б. н., проф. кафедры аквакультуры и болезней рыб Санкт-Петербургского государственного университета ветеринарной медицины, которая посвящена основным вирусным болезням форели, изучим ситуацию взрыва вирусных болезней, остановимся на конкретных заболеваниях и диагностике вирусных болезней.
Содержание
Современный «взрыв» вирусных болезней
Когда мы говорим о современном взрыве вирусных болезней, надо понимать, что именно произошло. И это действительно взрыв в прямом смысле этого слова. Если раньше рыбу выращивали в прудах и бассейнах, и количество выращиваемых видов рыб было минимальным — карп, форель, канальный сомик еще некоторые виды, то сейчас в условиях садкового выращивания культивируется огромное количество видов рыб: одних только сомовых, например, три вида. Это канальный сом, пангасиус, клариевый сом.
Количество объектов культивирования, особенно в садках, увеличилось в 10 раз как минимум. Соответственно появление большого количества вирусных болезней объясняется тем, что начали выращивать большое количество разных видов рыб. Каждый вид рыбы имеет свои вирусные болезни, своих вирусных возбудителей. Когда это была дикая рыба, когда она плавала в морях, океанах или в речке, то проблемы вирусных болезней практически не было. У дикой рыбы хороший иммунитет, разреженные плотности (рыбы обитают на большой площади), мало контактов между рыбами и т. д.
При выращивании в аквакультурных условиях рыба находится в ограниченной емкости в огромных количествах, рыба стрессированна, иммунитет резко ослаблен, и соответственно большое количество заболеваний возникает. И в первую очередь это не только вирусные болезни, это и другие болезни — паразитарные, бактериальные. Ихтиопатология сейчас развивается крайне быстро, потому что встречает множество вызовов, они наносят такие потери, что приходится этим заниматься — т. е. мы сами создали проблему и теперь мы эту проблему решаем.
Итак, наша тема — это форель. Форель мы выращиваем в пресной воде, но основной объем, во всяком случае, лососевых рыб выращивается в морских садках, в океанах. Это по сути один вид рыбы — это атлантический лосось. Но если мы сейчас посмотрим на мировую практику, даже в рамках выращивания одного вида, у атлантического лосося огромное количество вирусных заболеваний. Здесь специально выделены вирусные болезни, и как правило, это атлантический лосось,
- Инфекционная анемия атлантического лосося. Встречается после пересадки смолтов в морские садки. Смолты — это мальки.
- Болезнь поджелудочной железы — тоже встречается в морских садках, тоже когда молодь из пресной воды пересаживают в морские садки. Болезнь очень тяжелая.
- Вирусный некроз эритроцитов, иридовирус.
- Эпизоотический некроз гемопоэтической ткани, встречается у многих видов рыб, включая форель.
- Папиломатоз атлантического лосося, герпесвирус встречается на рыбозаводах, в том числе у нас на северо-западе Мурманской области.
- Синдром эритроцитарных телец включений — ортореовирус, и т. д.
Мы видим огромное количество вирусов, и все они появились только тогда, когда мы их начали культивировать в разных условиях.
Вирусология — это очень непростая наука. Мы уже говорили ранее, что вирусы — это очень примитивно организованные существа, это фактически молекулы ДНК или РНК, окруженные белковой оболочкой, и все. Вирусов сейчас насчитывается не менее 300 видов. Здесь приведены семейства вирусов. Мы рассмотрим РНК-содержащие вирусы и ДНК-содержащие семейства.
Вирусология — это особая наука, очень непростая наука. По сравнению с бактериологией намного сложнее, потому что вирусы не растут на питательных средах, на чашках Петри, в отличие от бактерий. Им для культивирования, для выращивания нужны клеточные культуры, и вот тут мы сталкиваемся с основной проблемой. Чтобы выращивать вирус, нужно создать клеточную культуру. Клеточная культура — тоже не простая. Это живые клетки, которые находятся в искусственной среде, которую мы создаем. И чтобы живые клетки не просто жили, а чтобы размножались, чувствовали себя хорошо, эта питательная среда должна подходить под каждую конкретную клетку, которую мы выращиваем.
Таким образом, сейчас фактически вирусология разделена на две большие группы. Первая группа — это создание клеточных культур, на которых мы можем выращивать вирусы, особое направление, большое, серьезное направление, очень трудоемкое, т. к. трудно получить максимально подходящую культуру клеток, в которой бы вирус «себя неплохо чувствовал».
С другой стороны, это уже сама непосредственно вирусология, когда мы заражаем эти клеточные культуры, когда мы наблюдаем за этим вирусом, смотрим, как он размножается, как он себя ведет. Клеточные культуры нужны для того, чтобы создавать вакцины. Если мы не будем создавать вакцины, то мы погибнем от этих вирусных заболеваний. Действительно, против вирусов работает только одно — вакцинация.
Чтобы создать вакцину, надо приложить очень много усилий. В данном случае, с одной стороны, присутствует огромное количество вирусных заболеваний, наносит колоссальный ущерб, с другой стороны, подступиться к этому очень и очень непросто. Поэтому сейчас львиная часть исследований по болезням рыб — это вирусология и масса специалистов работает в области этой науки.
Вирусная геморрагическая септицемия
Вирусные болезни, которые мы будем рассматривать, — это вирусные заболевания у рыб, встречающиеся на территории России.
Начнем с вирусно-геморрагической септицемии или так называемой ВГС. В чем особенность этого заболевания? На слайде указано, что более 50 видов рыб, пресноводных и морских, заражаются этим вирусом, включая лососевых, сиговых, щуку, окуня.
Болезнь настолько опасная, что входит в список Международного эпизоотического бюро, она находится под международным контролем. Перевозка рыбы без указаний, что рыба свободна от этого возбудителя, запрещена категорически. Возбудитель — рабдовирус
Впервые болезнь первой была описана еще в 1930 году Сейчас эта болезнь хорошо изучена, ограничена северным полушариям, потому что заболеванию подвержены северные рыбы. Это лососи, сиги, щука, окунь. В тропиках они отсутствуют. Для них в тропиках очень жарко. Однако болезнь широко распространена, безусловно.
Если обратиться к эпизоотологии, географии распространения вируса, можем увидеть, что он был выделен у рыб в России, Швеции, Дании, Норвегии. Так, нас «окружили» страны, в которых этот вирус встречается. Эта болезнь зафиксирована не только в европейских странах, но и по всему миру, но только в странах, которые находятся на севере — США, Канада, Япония. Из европейских стран недавно отмечены вспышки Хорватии, Словакии, Италии.
Из российских рыб заражается радужная форель и кумжа. Кумжа — это фактически ручевая форель, рыба, которая живет у нас в ручьях. Кумжу мы не культивируем, не выращиваем в садках, но это наша обычная речная рыба — кумжа. Болеют европейские хариус, сиги, поражаются рыбы всех возрастов. Температура, при которой развивается заболевание низкая, 3−14°, и затухает при дальнейшем повышении температуры.
О температуре мы с вами потом поговорим отдельно, подводя итоги, — это очень важно. Как при всяком вирусе, мы видим, что отход молоди может доходить до 100%. Так, когда происходит вспышка заболевания, погибает практически вся рыба, почти 100%.
Болеет в основном молодь, старшие рыбы если болеют, то у них иммунитет крепче, и значительная часть рыбы переживает эту болезнь, выживает, но все равно потери большие: 30−70% взрослых рыб могут погибнуть от этого вируса, это очень много.
Течение болезни. ВГС встречается в острой, хроническая и нервной форме. Заболевания в острой форме представляют наибольшую опасность, т. к. связаны с высокой смертностью рыбы, опять же при условии подходящей температуры (9-12°) — будет острая вспышка. Если температура другая, то болезнь будет протекать хронически, в «замедленном» режиме.
Все рыбы, пораженные вирусом, имеют сходную клинику: у рыб отмечается потемнение кожи, пучеглазие, кровоизлияния в глазах, основании плавников и анемия жабр.
Анемия жабр фактически присутствует при всех вирусных заболеваниях, о которых мы с вами будем говорить. Это один из главных признаков. Также признаком является многочисленные кровоизлияния в скелетных мышцах. Многочисленное кровоизлияние в скелетных мышцах — это визитная карточка этой болезни.
Дополнительные признаки, как-то неравномерный окрас и бледность почек и печени, скорее, в сфере ведения специалистов. Но для нас важно массовое кровозлияние на внутренних оргах, на поверхность тела и в мышцах.
Хроническая форма характеризуется низкой смертностью. Наблюдаются те же признаки, только в не такой яркой форме. Кровоизлияние будет поменьше, но будет потемнение кожи, анемия — это вот основные признаки. При нервной форме болезни смертность очень низкая. Но «нервная форма» — это вообще не форма, это затухание болезни, и при затухании болезни иногда поражается и головной мозг. И тут мы видим, что у рыбы нарушен характер плавания, что связано с поражением мозга, координацией движений, равновесия.
На данной иллюстрации можно увидеть «визитную карточку» этого заболевания — массовые точечные кровоизлияния в мускулатуре больной рыбы. Такие кровозлияния довольно характерны именно для ВГС. И видно, что рыбка довольно крупная, потому что мальки, погибнут раньше, еще до появления этих кровоизлияний. Крупная рыба борется долго и пытается поправиться, но это у нее, как правило, не всегда получается.
Источник инфекции. Когда мы говорим о вирусах, любая больная рыба и все, что с ней связано, — это источник вирусов.
Больная рыба, икра, трупы погибших рыб и даже птицы, которые едят этих рыб, и могут на лапках или еще на перышках перенести в другой водоем этот вирус. Вирус очень устойчив во внешней среде и таким образом может распространяться. Больные бессимптомные рыбы — это самые активные распространители. Если рыба переболела, она приобретает иммунитет, но остается вирусоносителем. Болеть она, соответственно, не будет. И если мы куда-то повезли эту рыбу, она в себе везет и этот вирус. Как только вирус попадает в стадо или на хозяйство, где рыба с этим вирусом никогда не встречалась, опять происходит вспышка. Дезинфекция икры помогает, но иногда бывает и проколы. Можно и с икрой тоже перевести этот вирус.
Это так называемая вертикальная передача. Переболевшая рыба приобретает стойкий иммунитет, как уже было сказано. Если рыба переболела, она становится носителем, но сама уже никогда не заболеет.
Что касается профилактики и меры борьбы при вирусах, ничего не помогает, никаких лекарств нет, помогает только вакцина.
В некоторых странах пытаются создать вакцину против ВГС. Во Франции уже 18 лет создают и выпускают эту вакцину, но до сих пор хороший результат так и не получили.
В отличие от людей, у рыб с вакцинацией все не так просто, у них очень многое зависит от того, в каком возрасте рыбу провакцинировали, при какой температуре рыбу провакцинировали, чтобы получить иммунитет, нужно много условий, у рыб всё очень нестабильно. Человеческий организм и у рыбы отличается тем, что у нас всё стабильно, а в организме рыбы всё нестабильно, всё определяется температурой, многие об этом забывают, но на самом деле на это нужно обращать внимание,
Инфекционный некроз гемопоэтической ткани
Болезнь вызывает новирабдовирус. В пресной воде при температуре 15° вирус живет 25 дней, в соленой воде около 12 дней.
Это заболевание, которое наблюдается у молоди рыб в пресной воде. В морской воде оно не встречается. ВГС (предыдущее заболевание) может наблюдаться даже и в соленой воде. Данное заболевание — только в пресной воде. Хранение при температуре минус 25° не уменьшает заразности вируса. Вирус — это фактически неживой организм, поэтому вирус легко держит любую температуру, особенно низкую.
Болезнь включена в список особо опасных заболеваний Международного эпизоотического бюро, обнаружена в Европе в конце 1980 года. Самые интересные последние сведения — в 2018−2019 годах вспышки зарегистрированы в Эстонии, Македонии, Италии, болезнь гуляет по Европе и может появиться в любой стране. В некоторых странах могут и не заметить эту болезнь, и не сообщить о ней.
Самое главное, что болеет не крупная рыба, а именно молодь. Не только радужной форели, но и других лососевых Тихого океана Вообще радужная форель — это рыба, которая пришла к нам из Америки, это американская форель, и она относится к группе тихоокеанских лососевых.
Кижуч и гольцы устойчивы к заболеванию. Щука не столь восприимчива, т. е. она может быть носителем. Болезнь, опять-таки, есть везде, в Северной Америке, на Дальнем Востоке, в Центральной Европе.
По своим симптомам отличается от ВГС. Первое, как я уже сказал, в основном страдает молодь. Рыбы старших возрастов гибнут редко, значит, потери крупных рыб будет незначительной. А вот потери мелкой рыбы будут очень и очень значительные. Сто процентов фактически. Острое течение заболевания отмечается при температуре воды 8−12°. Это любимая температура всех вирусов, лососевых и форели в том числе. Просто вирусу хорошо при этой температуре. Все определяется температурой.
Отход у молоди составляет 80−90%, а годовики уже совсем не так много, 20−30%, хотя это, конечно, колоссальная гибель.
Клиника будет немного отличаться. При ВГС, как мы сказали, массовое кровоизлияние, в том числе и в мышцах. Здесь заболевают мальки, молодь, и у них клиника немного другая. Все больные рыбы вялые, как и при любой болезни, они плавают у поверхности воды, лежат на дне.
Основные клинические признаки. У рыб отмечается потемнение тела, пучеглазие, вздутие брюшка — так называемый «симптом проглоченной горошины». Анемия жабр, иногда полосчатые кровоизлияния на теле. Из ануса свисают длинные слизистые тяжи сероватого цвета. Это очень характерный признак, который надо запомнить. Желудочно-кишечный тракт чем-то заполнен молочносодержимым белым, но это не главное. Главное — то, что было впереди. Хроническая форма болезни отмечается у рыб старших возрастов при низкой температуре воды. Также отмечается анемия жабр и кровоизлияние вокруг селезенки.
Когда температура воды не 8−12°, а ниже, например, 5−6 °, то мы не можем понять, в чем дело, почему рыбка темнеет, отказывается от корма и погибает. И отчего она погибает, никто не может понять, потому что нет ярких клинических признаков. И гибнет она не массово, а гибнет небольшими количествами. Раз гибнет не массово, значит, у нас уже с вирусом как-то и не связано заболевание. Мы ищем некую другую причину: корма неподходящие, условия неподходящие, еще что-то.
Таким образом, острое проявление — это хорошо, легко увидеть по клиническим признакам и поставить диагноз. При хроническом проявлении, постановка диагноза очень затруднена, потому что этой клиники яркой просто нет. Мы не знаем, все-таки на что опираться при постановке диагноза.
На этом изображении несколько больных рыб. Если внимательно посмотрим, то увидим, что на брюшке характерное вздутие, будто они действительно проглотили горошинку. То есть локальное вздутие в виде шарика. Из ануса белые тяжи — «длинные белые нитки», очень характерный признак. Также среди тех признаков, которые мы на иллюстрации не увидим, может быть анемия, то есть жабры практически белые, мы приподнимаем жаберную крышечку, смотрим, а жабры вместо того, чтобы быть красными, белые почти как бумага, то есть крови у рыбы уже нет.
В целом, этих трёх признаков: «рыба проглотила горошину», слизистые тяжи из ануса, бледные анемичные жабры иногда бывает достаточно, также картину дополняет массовая гибель, когда всё покрыто белым «ковром» из погибших рыб на поверхности воды, чтобы понять, что это, скорее всего, вирус.
На данной иллюстрации — уже подросший сеголеток, который весит грамм 200, может быть чуть даже больше. Видим, что у него светлые жабры. Они не белые, но они розовые, хотя они должны быть темно-красными. И вокруг селезенки в задней части тела мы видим темное пятно — это увеличенная селезенка, а в жировой ткани розовые вкрапления — это кровоизлияние в жировую ткань пошло. Вот так проявляется уже более взрослая рыба. Такая рыба может переболеть, а потом будет нормально жить, но она долгое время будет вирусоносителем.
На данном изображении — маленький малек с полосчатыми или так называемыми «шевронными кровоизлияниями». Кровоизлияния идут изогнутой линией, вдоль мышечного волокна в видеусловной «галочки». Такие «шевронные» кровозлияния появляются только тогда, когда температура воды 10°, наблюдается острая форма заболевания с кровоизлияниями и пр.
Распространение. Ну, опять-таки, возможно, если рыба дикая, если рыба переболела, возможна циркуляция вируса даже без возникновения вспышек. Обычно болезнь появляется тогда, когда у рыбы какие-то стрессы. Перенос, перевозки — это стресс, и тут вирус может выскочить. Он «сидит» в рыбе никто его про этот вирус не знает. Но условия среды изменились, и тут появляется вирус. Вирус распространяется, передается с фекалиями, мочой, половыми продуктами и, соответственно, с больными, переболевшими рыбами и трупами переболевших рыб.
Профилактика и меры борьбы. Можно уверенно сказать, что не существует никаких лекарств и способов борьбы, кроме вакцинации и карантина. Если мы установили диагноз, то хозяйство объявляется неблагополучным, на него накладывается карантин, а всю заболевшую рыбу уничтожают.
Рыбоводные емкости, инвентарь дезинфицируют негашеной или хлорной известью, хозяйство выдерживает без рыбы несколько месяцев, и потом, если вы снова завозите на это хозяйство рыбу, не факт, что болезни снова не появятся. Вирус может быть в водоисточнике, если рыба убежала в водоисточник и там носители, вполне может опять появиться вспышка.
С этой болезнью очень тяжело бороться, необходимы очень строгие ограничительные меры. Ну и, соответственно, как можно заполучить эту болезнь, если кто-то к вам привез молодь? — Когда вы закупили молодь в каком-то хозяйстве, думая, что хозяйство благополучное, но оказалось, что не так. Привезли рыбу, и у вас и среди этой рыбы, и среди вашей собственной рыбы началась гибель. Конечно, если заболевание отмечено в каком-то хозяйстве, вывоз ни икры, ни рыбы из этого хозяйства невозможен.
Возбудитель распространяется диким, «подпольным» способом. Может быть, даже никто и умысла-то злого не имел, но просмотрели — не знают, чем рыбка переболела. А переболела она вирусом, просто не в острой форме. И никто даже не знает, что тут было это серьезнейшее заболевание, рыбу повезли куда-то дальше, и в другом хозяйстве произошла вспышка.
Инфекционный некроз поджелудочной железы
Инфекционный некроз поджелудочной железы — третье заболевание, которое встречается на территории РФ и «гуляет» по нашей стране. Возбудитель — бирновирус, т. е. каждая болезнь — это свой другой вирус. Но надо сказать, что он очень похож на предыдущего возбудителя, все очень и очень схоже.
Но предыдущему заболеванию голец не подвержен, а здесь голец болеет. То есть, это все лососёвые рыбы, но у каждой рыбы есть какая-то резистентность к этому вирусу. У кого-то больше, у кого-то меньше.
Опять-таки, как и у предыдущего заболевания, это «детская болезнь». То есть, отмечается у мальков в возрасте 1−4 месяца как острая вспышка, тяжело протекающая. Если это рыбы у нас взрослые, крупные, то болезнь будет протекать незаметно, субклинически, гибель будет незначительная. Поэтому, когда заболевает крупная рыба, можем и пропустить вспышку этого заболевания.
Оптимальная температура — 10−12°, но вообще диапазон, когда этот вирус себя «хорошо чувствует» — 5−17°. Другое дело, что при другой температуре болезнь протекает в хронической форме, а в основном течение болезней сходно. Таким образом, это болезни, которые очень похожи друг на друга, и отличить могут только специалисты после проведения вирусологических анализов.
Будет то же самое пучеглазие, увеличение брюшка, будто рыба проглотила горошину, точечное кровозлияние, те же тяжи, жабры анемичны, поэтому, если появились такие признаки, то никто, даже специалист, вам сразу не скажет, с какой болезнью имеет дело. Едва ли имеет значение, какая болезнь, потому что явно, что это болезнь вирусная, очень тяжелая, и только потом по результатам анализа будет известно, какой возбудитель. То ли болезнь IPN, то ли инфекционный некроз гемопоэтической ткани. Результаты всегда печальны, гибели рыбы может быть до 100% примерно, если это молодь.
Вирус точно так же распространяется разными путями: экскременты, половые продукты, через жабры, кожу. Переболевшая рыба приобретает стойкий иммунитет, но она остается носителем и может передавать возбудитель. Профилактика и меры борьбы те же самые. Так, при появлении этого вируса, инфекционного некроза поджелудочной железы, на хозяйство накладывается карантин, рыба уничтожается.
В Норвегии против этого заболевания разработана вакцина, но нигде не сказано, сколько она эффективна. Действительно, против вирусных заболеваний разрабатываются вакцины, но они не всегда успешны, не всегда доступны. У нас в России таких вакцин нет.
Диагностика вирусных болезней
Чтобы поставить диагноз на вирусную болезнь, надо обращаться в определенную лабораторию. Таких лабораторий у нас всего три: в Москве, во Владимире, и еще одна лаборатория в городе Покрове, там расположены крупные ветеринарные научные институты, которые, в том числе занимаются и болезнями объектов аквакультуры. Мы стараемся, конечно, с ними связываться, но есть определенные нюансы. При обращении к специалистам предлагается привозить больную рыбу на диагностику, сами лаборатории не выезжают. Как привезти эту больную рыбу, знают только специалисты. Надо знать все эти тонкости. Если вы неправильно собрали материал, неправильно отвезли, то ничего они там не найдут. Некая халатность по отношению к вирусным болезням у нас присутствует. Представители лабораторий из-за недостатка финансирования не могут специально выехать по всем хозяйствам. Поэтому у нас вирусы распространяются, и кто-то сталкивается с вирусным заболеванием и об этом никто не знает.
За границей иная ситуация. В Финляндии ежегодно все хозяйства обследуются на вирусные болезни. В любом случае приедут, заберут материал, либо ты сам отправляешь материал, тебе обучат, как отправлять материал в референтную лабораторию, и там они сделают всё, что надо. И они, что называется, держат руку на пульсе, то есть они видят, что у них делается с вирусными болезнями. Если где-то вирус находят, то, соответственно, применяют вот эти драконовские меры, о которых сказано выше. Но и ситуация с вирусом у них контролируема, он не распространяется широко. Еще одна особенность, поскольку вирусные заболевания очень сложно диагностировать, в Евросоюзе есть отдельные лаборатории, которые специализируются на отдельные вирусные болезни, поэтому у них международное сотрудничество.
Если заподозрили, что это такой-то вирус, в Финляндии, например, его могут отправить во Францию, где специалисты очень тонко, хорошо разбираются. И там эта референтная лаборатория точно определит вирус. То есть вот это все в комплексе позволяет им, если не сдерживать распространение вируса, то хотя бы отслеживать, где и какие вирусы, и иметь представление об эпизоотической обстановке по вирусным болезням.
Владимир Воронин, д. б. н., проф. кафедры аквакультуры и болезней рыб Санкт-Петербургского государственного университета ветеринарной медицины. Лекция проведена в рамках курса «Болезни лососевых и сиговых рыб при садковом выращивании в условиях Северо-Запада России».
