Мы начинаем серию публикаций материалов онлайн-курса «Вирусные и бактериальные болезни птичьего стада», подготовленного ведущими экспертами в области ветеринарии — Эдуардом Джавадовым и Оксаной Новиковой. Первая лекция курса посвящена одной из самых актуальных тем для птицеводства — гриппу птиц. Лекция Эдуарда Джавадова о гриппе птиц охватывает широкий спектр вопросов, начиная с истории возникновения вируса и заканчивая современными подходами к его профилактике.
Спикер описывает клинические признаки заболевания, а также делится актуальной информацией о серологических и вирусологических методах диагностики. В лекции обсуждаются меры профилактики, включая важность вакцинации и трудности борьбы с вирусом в промышленных птицеводческих хозяйствах.
Содержание
История проблемы гриппа птиц
Проблема гриппа птиц существует уже давно и всегда была актуальной для птицеводческих хозяйств. На слайде №1 представлены данные о распространении птичьего гриппа в 1994 году в Мексике и в 1995 году в Пакистане, вызванного серотипом H7. Этот вирус продолжал вызывать опасения, а в 2004–2005 годах появилось новое проявление вируса — штамм H5N1, который стал причиной масштабных вспышек заболевания.
Слайд №1
Птичий грипп — это серьезное заболевание, вызванное вирусом из семейства Paramyxoviridae. Как видно на слайде №2, эпидемия началась в 2004 году в Юго-Восточной Азии, откуда вирус распространился на территорию Российской Федерации. Однако в России птичий грипп стал проблемой не только в частном секторе, как это наблюдалось в Европе и Азии.
Слайд №2
В России птичий грипп стал серьезной угрозой не только для частных хозяйств, но и для крупных птицеводческих предприятий. Одним из первых таких хозяйств, пострадавших от вируса, стала Утятская птицефабрика в Курганской области. Говоря о гриппе птице, или, как его называют зарубежные коллеги, высокопатогенном гриппе птиц (ВГП), на слайде №3 представлена информация, иллюстрирующая ключевые моменты этого заболевания.
Слайд 3
Объяснение относительно неправильное, если говорить с академической точки зрения, то этот грипп является высоковирулентным, а не высокопатогенным.
Морфология вируса птичьего гриппа
Вирус гриппа птиц состоит из 8 РНК-сегментов, каждый из которых кодирует отдельный антиген. Из этих 8 антигенов 6 являются постоянными — это матриксный белок, НС-белок и НП-белок. Эти сегменты РНК вируса гриппа присутствуют не только в птичьем гриппе, но и в вирусах гриппа, поражающих млекопитающих.
Основные антигены вируса — гемагглютинин и нейроминидаза — отличаются для различных вариантов вируса гриппа. На сегодняшний день известно 16 вариантов гемагглютинина и 9 вариантов нейроминидазы. Таким образом, существует до 144 различных вариантов вируса птичьего гриппа, что подчеркивает его разнообразие и способность к мутациям.
Распространение вируса
На слайде №4 указано, что основным переносчиком любого вируса гриппа является дикая перелетная водоплавающая птица.
Слайд №4
Исторически дикая перелетная птица играла ключевую роль в распространении вируса гриппа на другие виды животных, включая лошадей, домашнюю птицу и свиней. Обычно вирус передавался человеку через свиней, что и вызывало эпидемии и пандемии, с которыми человечество сталкивается почти ежегодно. Однако в 2004 году было установлено, что птичий грипп может передаваться человеку напрямую от птиц, что стало новым и тревожным открытием.
Вирус H5N1, который вызвал серьезные вспышки как среди птиц, так и среди людей, представляет собой особую угрозу, так как смертность среди инфицированных людей достигает 60%. Этот факт подчеркивает опасность вируса, и, несмотря на современные научные достижения, полное предотвращение его распространения остается невозможным. Стоит отметить, что почти все новые штаммы человеческого гриппа продолжают появляться в странах Юго-Восточной Азии.
Вирус гриппа постоянно видоизменяется благодаря двум процессам: мутации и реассортации, как видно на слайде №5.
Слайд №5
Мутация представляет собой изменение в геноме вируса, что приводит к трансформации таких его компонентов, как гемагглютинин и нейроминидаза. Эти изменения делают вирус более устойчивым и позволяют ему уклоняться от иммунного ответа
Реассортация — более сложный процесс, происходящий, когда в одну клетку попадают два разных вируса гриппа. Внутри клетки вирусы делятся на восемь сегментов, размножаются, а затем собираются обратно. Если, например, вирусы H1N1 и H2N2 попадают в одну клетку, на выходе могут образоваться совершенно новые гибриды, такие как H1N2 и H2N1. Эти новые вирусы будут обладать изменёнными антигенными и вирулентными свойствами.
Когда вирус птичьего гриппа впервые появился в 2004 году в Юго-Восточной Азии, считалось, что он поражает только птиц — диких, перелетных и домашних. Однако уже в 2005 году ученые, в частности из Бангладеша, выяснили, что вирус способен проникать в организм животных семейства кошачьих, таких как домашние кошки, тигры и леопарды. Более того, эти животные могут стать разносчиками вируса. Поэтому в борьбе с вирусом гриппа птиц необходимо учитывать, что кошки также могут быть источником его распространения.
Клинические и патологоанатомические признаки заболевания
Слайд №6
Клинические признаки птичьего гриппа могут варьироваться, но в первую очередь поражаются дыхательные пути — вирус атакует верхние дыхательные пути и лёгкие. Также могут быть затронуты органы желудочно-кишечного тракта. Самой уязвимой к вирусу категорией птиц является индейка, за ней следует курица и другие домашние птицы. У индейки заболевание протекает наиболее тяжело, часто сопровождаясь выраженным геморрагическим синдромом, кровоизлияниями в органах респираторного и кишечного тракта.
С 2005 года птичий грипп стал проявляться в крупных птицеводческих хозяйствах Российской Федерации, в том числе в так называемых хозяйствах закрытого типа. Предполагалось, что такой режим работы обеспечит защиту от проникновения вируса, но на практике это оказалось не так. Немаловажную роль в распространении вируса играют синантропные птицы, такие как голуби, воробьи и вороны, которые являются сильнейшими разносчиками гриппа. Особенно это касается тех птицефабрик, на территории которых можно найти разлетающийся корм, что привлекает этих птиц. Поэтому необходимо предпринимать меры по их отгонке для минимизации риска заражения.
На слайде №7 и №8 продемонстрировано, как патологоанатомически и клинически проявляется грипп птиц у петуха. Видны черные пятна на гребне, и можно заметить, как гребень у зараженного петуха становится черным, в то время как у контрольного он остается ярко-красным. 
Слайд №7
Слайд №8
Важно отметить, что от птичьего гриппа страдают не только индейки и куры, но и водоплавающая домашняя птица, включая гусей и уток. У уток часто наблюдается специфический симптом — апистотонус (слайд №9), когда птица вытягивает лапы вдоль туловища и запрокидывает голову на спину. Это признак сильного поражения центральной нервной системы.
Слайд №9
Кроме того, птичий грипп сопровождается выраженным геморрагическим синдромом, что проявляется кровоизлияниями в различные органы и ткани.
Одним из характерных признаков птичьего гриппа являются кровоизлияния в сердце, сопровождающиеся серозно-фибринозным перикардитом (слайд №10).
Слайд №10
Также часто наблюдаются кровоизлияния на границе между мышечным и железистым желудком (слайд №11).
Слайд №11
Ранее этот признак считался патогномоничным для ньюкаслской болезни, и опытные ветеринарные врачи сразу могли поставить этот диагноз, увидев геморрагический поясок в указанной области.
Однако сегодня этот симптом уже не является патогномоничным, то есть не характерен только для нюкаслской болезни, так как он встречается и при других инфекциях, таких как болезнь Гамборо и гриппе птиц. Характерные видоизменения и характерные геморрагические симптомы наблюдаются в верхних дыхательных путях на трахеи, на гортане (слайд №12), в основном на слизистых.
Слайд №12
На слайде №13 можно увидеть петлю 12-перстной кишки и внутри её поджелудочную железу, на ней мы видим геморрагические пятна. Это тоже характерный признак гриппа птиц, но сразу повторюсь, не только гриппа. И при ньюкаслской болезни мы тоже наблюдаем точно такие же признаки.
Слайд №13
Геморрагические изменения затрагивают лимфоидные органы, такие как илеоцекальные железы (слайд №14).
Слайд №14
У водоплавающих птиц часто встречается катаракта и поражение зрительных органов, в основном глаз.
Диагностика вируса гриппа птиц
Диагноз на грипп птиц ставится комплексно, с учётом как клинических признаков, так и серологических и вирусологических исследований (слайд №15).
Слайд №15
При обнаружении характерных патологических изменений у птиц при вскрытии, необходимо отобрать пробы патологического материала. Прежде всего, это головной мозг, селезенка, легкие и трахея. Эти образцы помещаются в банку с глицерином и отправляются в лабораторию для дальнейших исследований.
В лаборатории первым этапом проводятся вирусологические исследования. Обычно материал вводится в аллантоисную полость куриных эмбрионов. Через несколько дней исследуют аллантоисную жидкость, проводя реакцию гемагглютинации. Если обнаруживается гемоагглютинирующая активность, это свидетельствует о наличии гемогглютинирующего агента в патологическом материале. Однако это не всегда означает, что причиной является вирус гриппа — это может быть и другой вирус, например, вызывающий ньюкаслскую болезнь. Поэтому важно провести дальнейшую дифференциацию.
Среди серологических методов диагностики основными являются реакция торможения гемагглютинации и иммуноферментный анализ (ИФА). При серологическом исследовании рекомендуется брать парные пробы сыворотки для того, чтобы оценить изменение титров антител и определить, происходит ли их увеличение.
На мой взгляд, наиболее надежным методом является реакция торможения гемагглютинации, которая, по сравнению с иммуноферментным анализом, даёт более точные результаты. Это справедливо не только для диагностики гриппа птиц, но и для других вирусов с гемагглютинирующими свойствами, таких как вирус ньюкаслской болезни.
Помимо реакции торможения гемагглютинации, существуют и другие методы диагностики, которые можно использовать для более полного исследования. Это реакция нейтрализации, иммунофлуоресценции и полимеразная цепная реакция (ПЦР). Эти методы играют ключевую роль как в серологической, так и в вирусологической диагностике гриппа птиц, позволяя с высокой точностью определить наличие и вид вируса.
На слайде №17 представлена диагностическая лаборатория, и я хотел бы выразить благодарность коллегам из ФГБУ «ВНИИЗЖ» — это именно их лаборатория.
Слайд №17
В ней проводятся такие анализы, как иммуноферментный анализ (ELISA), полимеразная цепная реакция (ПЦР), а также реакция торможения гемагглютинации. На слайд №18 мы проводим диагностический тест. Если птица прошла процедуру вакцинации, то мы этот метод можем использовать и для контроля напряженности иммунитета.
Слайд №18
На слайде №19 показаны различные методы диагностики, включая ELISA, реакцию диффузионной преципитации и реакцию задержки гемагглютинации.
Первые два метода помогают установить, присутствует ли вирус гриппа, но не позволяют определить конкретный его вариант. 
Слайд №19
Чтобы точно установить, какой штамм вируса (например, H5, H7 или H6) циркулирует в хозяйстве, необходимо проводить реакцию задержки гемагглютинации. Это наиболее точный метод, который позволяет дифференцировать штаммы вируса.
Меры профилактики и контроля
Если в хозяйстве будет выявлен птичий грипп, это автоматически накладывает карантин на данное предприятие, независимо от его местоположения в России. Особую угрозу представляют высоковирулентные штаммы вируса, такие как H5 и H7, вызывающие массовую смертность среди птиц. Даже если штамм не относится к H5 или H7, но вызывает значительный падеж, это также требует введения карантинных мер.
При введении карантина важно помнить, что он продолжается 21 день и снимается только после 21 дня с момента последнего случая заболевания и выполнения всех заключительных мероприятий (слайд №20).
Слайд №20
В этот период необходимо провести обязательный убой всей птицы, как в частных подворьях, так и в птицехозяйствах, если птица содержится в открытых дворах или в помещениях, предназначенных для ее содержания. Убой должен проводиться бескровным методом. В частном секторе обычно применяется инъекция детилина, что позволяет провести гуманное уничтожение птиц.
В промышленных птицехозяйствах для этого используется углекислый газ. Для этого подвозят танкер с СО2, который закачивается в птичник. Но на практике можно обойтись и более простым методом, с которым я также сталкивался. Один из вариантов — это отключить вентиляцию в помещении. Все ветеринарные врачи знают, что спустя 2-3 часа без вентиляции птица задохнется. После этого, вскрыв помещение, мы увидим, что вся птица лежит на полу или в клетках. После этого необходимо собрать ее, вывести за пределы птичника, вырыть траншею и захоронить тела, чтобы минимизировать риск заражения.
Стоит отметить, что на данный момент, согласно разрешениям Россельхознадзора, сжигание трупов птиц не является обязательным. Врачи-практики знают, что сжигание птицы, особенно индейки, затруднено из-за малого содержания жировой ткани, что делает процесс горения неэффективным. Куры сжигаются проще, но все равно этот процесс не всегда оптимален. Поэтому на сегодняшний день разрешено проводить захоронение птицы в земле, глубоко зарывая ее, что также помогает избежать заражения и распространения инфекции.
Разработка вакцин против птичьего гриппа
В 2004-2005 годах, когда в России возникла угроза птичьего гриппа, Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства (ВНИВИП) первым предложил приступить к разработке средств специфической профилактики. Наш институт разработал вакцины против различных штаммов вируса гриппа птиц, включая вакцины против вариантов H5 и H7, а также бивалентную вакцину, объединяющую оба штамма (слайд №21).
Слайд №21
Мы считали, что такой подход был необходим, так как на юго-востоке России угрожал вирус H5, а на западе страны — вариант H7, который в то время активно циркулировал в Европе, особенно в Италии.
Несмотря на успешное создание этих вакцин, они не нашли широкого применения. Основной причиной стал запрет Россельхознадзора на использование вакцин, так как серологическое тестирование не позволяло отличить провакцинированную птицу от зараженной. Несмотря на это, я тогда утверждал, что для России такая мера не была бы критичной, так как вирус в основном распространялся в птицеводческих хозяйствах закрытого типа, где его проникновение можно было контролировать.
Очень часто у меня были курсы повышения квалификации и я спрашивал ветеринарных врачей, кто из них рискнет не провакцинировать против Ньюкасловской болезни или болезни Гамборо. Почти всегда получал ответ, что, конечно, не рискнем, потому что понимаем, что, скорее всего, не провакцинировав, мы получим клинические признаки Нюкасловской болезни или болезни Гамборо, потому что в птицеводстве в основном защищают на сегодняшний день средства специфической профилактики.
В отличие от гриппа птиц, вирусы Ньюкаслской болезни и болезни Гамборо имеют более низкую контагиозность. Однако, как показывает практика, даже меры защиты закрытого типа, включая барьеры и пропускные системы, не всегда достаточно эффективны. В птицеводстве одним из основных методов борьбы с инфекциями является вакцинация, и без неё нам не обойтись.
Вакцина, разработанная нашим институтом, прошла комиссионные испытания, в ходе которых был достигнут титр антител, превышающий требуемые показатели (слайд №22).
Слайд №22
Для варианта H5 титр составил 9,6 логарифма (практически 1 на 1000), для H7 — 9,82 логарифма. Научно установлено, что титр антител выше 4 логарифмов (что соответствует 1 на 16) гарантирует 100% защиту от вируса.
Однако после требования Россельхознадзора провести дополнительные эксперименты, наша вакцина была испытана в условиях, приближенных к реальной эпидемиологической ситуации, в Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии. Птица была вакцинирована и через две недели заражена высокопатогенным штаммом вируса гриппа. Результаты показали, что вакцина обеспечивала полную иммунную защиту.
К сожалению, несмотря на успешные результаты, Россельхознадзор запретил использование вакцины в открытых типах птицехозяйств, даже для защиты от высокопатогенных штаммов.
При этом мы говорили, что вакцина была разработана институтом из варианта H5N2, и есть метод выявления антител не только к гемагглютинину, а еще к антителу к нейроменидазе, и на основе отличия этих антител мы можем отдифференцировать у птицы антитела, потому что она получила патогенный вирус H5N1 или у птицы антитела, потому что это вирус, который находился в вакцине H5N2. По нейроменидазе мы могли это отличить, но однако меры предприняты не были.
На сегодняшний день ВНИИЗЖ имеет разрешение на производство вакцин из низкопатогенного штамма H9N2, которые используются в ряде птицехозяйств, а также в частном секторе, где птицу вакцинируют против этого вируса. Это положительный шаг, и я рад, что хотя бы в некоторых хозяйствах начали использовать вакцины для защиты птиц.
Будущее вакцинопрофилактики
Говоря о перспективах развития вакцин, стоит отметить, что многие ветеринарные врачи уже успешно применяют генно-инженерные рекомбинантные вакцины, разработанные для борьбы с такими заболеваниями, как оспа, инфекционный ларинготрахеит, болезнь Гамборо и ряд других инфекций. Этот метод был также использован в нашем институте совместно с НИИ гриппа под руководством академика Олега Ивановича Киселева, к сожалению, уже ушедшего из жизни.
Мы разработали рекомбинантную вакцину против птичьего гриппа, однако, несмотря на ее успешные научные результаты, она не нашла широкого практического применения, и на сегодняшний день в России такая вакцина не используется. Тем не менее, я уверен, что будущее за рекомбинантными вакцинами, и в будущем будет разработана эффективная вакцина, которая станет важным инструментом в профилактике и борьбе с этим заболеванием.
Что касается практики вакцинации в частном секторе, то, как показывают результаты работы Россельхознадзора, в неблагополучных по птичьему гриппу зонах проводились мероприятия по вакцинации птицы. Однако, несмотря на успешную вакцинацию в частных хозяйствах, где держат 10-20 голов птицы, в птицехозяйствах закрытого типа вакцинация против гриппа птиц не проводилась. Я многократно подчеркиваю, что это решение было ошибочным. Вакцинация в таких хозяйствах не представляет опасности, особенно если используются инактивированные вакцины, которые не приводят к распространению вируса.
Слайд №23
Будущее за рекомбинантными вакцинами, и я уверен, что в будущем вакцинация против птичьего гриппа будет проводиться с использованием более современных методов, таких как спрей-вакцинация (слайд №23), что значительно упростит процесс и повысит его эффективность.
Эдуард Джавадов, доктор ветеринарных наук, академик РАН, заслуженный деятель науки РФ, профессор кафедры эпизоотологии им. В.П. Урбана, директор Научно-исследовательского консультационно-диагностического центра по птицеводству ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»
Следующая лекция онлайн-курса «Вирусные и бактериальные болезни птичьего стада» посвящена Ньюкаслской болезни. В ходе лекции будут рассмотрены ключевые аспекты болезни, ее диагностика, профилактика и меры борьбы. Эдуард Джавадов поделится практическим опытом в лечении и контроле за распространением Ньюкаслской болезни, а также расскажет о новейших методах защиты птицы от этого заболевания.
