Данная лекция д-ра Тома Виклунда, доцента кафедры патологии рыб Академии Або, Финляндия, посвящена антибиотикам, побочным эффектам и биодоступности антибиотиков. Эксперт также раскажет о периодах выведения, антибактериальной терапии на рыбных хозяйствах и влиянию антибиотиков на окружающую среду.
Содержание
Лечение с использованием антибиотиков
Проблема антибиотиков, использования антибиотиков и следующей затем резистентности, является большой проблемой человечества и будет ей оставаться ближайшие 20-30 лет. Мы зависимы от антибиотиков, и мы очень много используем разные их компоненты. Но чем больше мы используем, тем выше становится резистентность. Если есть резистентность к антибиотикам, то болезни в разных животных и также людях, будут довольно ограниченны.
Антибиотик — это вещество или полусинтетическое вещество, полученное от микроорганизма и это вещество, способное в разбавленном растворе подавлять или убивать другой микроорганизм. Проблема данного определения — «разбавленный раствор». Что же значит «разбавленный раствор»? Антибиотик может также определяться как разновидность антимикробного препарата, используемого для лечения и профилактики бактериальной инфекции. Затем даем определение антимикробному препарату — вещество, убивающее или подавляющее рост микроорганизмов. И в дополнение, что такое антибактериальный препарат? В наши дни антибактериальные препараты используются многими людьми каждый день и это значит «антисептик» (как нечто, что Вы используете для дезинфекции рук). Это и антисептические средства, антибактериальное мыло, химические дезинфицирующие средства и т. д. Есть также другие определения антибиотика. Что это химическое вещество с селективным профилем токсичности, способное убивать или подавлять (это важно) рост бактерий, но неспособное оказывать токсическое воздействие на клетки-эукариоты (это тоже важно. Потому что Вы можете увеличить дозу антибиотика, и если концентрация будет очень высокой, то бактерия всегда будет уничтожена, но хозяин (животное или человек, который болен и заражен, должен выжить). Поэтому антибиотик не должен воздействовать на клетки-эукариоты в той же концентрации, которая обычно используется для лечения или профилактики бактериальных инфекций. Концентрация очень важна.
На сегодняшний день, антибиотики используются по-разному. У людей, антибиотики используются против бактериальных и грибковых болезней, для определенных хирургических процедур, а также для лечения рака. У животных антибиотики используются для активации роста, профилактики и во время болезней, для их лечения. Несколько лет назад основная часть антибиотиков использовалась для животных в сельском хозяйстве. И на изображении сверху справа мы видим, что 70% антибиотиков США используется для животных и всего лишь 30% для человека. То же самое происходит. В других странах, таких как Великобритания. Например, свиньи: большая часть антибиотиков использовалась для активации роста, а для препятствия развития болезней, поражавших животных, для лечения болезни использовалась лишь небольшая часть.
Если мы взглянем на разные страны, посмотрите на изображение посередине, использование антибиотиков имеет большие различия среди разных стран. Некоторые страны используют огромное количество, а другие меньшее количество (в рамках сельского хозяйства). Здесь вы также можете увидеть, что нордические страны (Финляндия, Швеция, Дания, Норвегия и Исландия) не используют большое количество антибиотиков, в сравнение со странами центральной и южной Европы.
Использование антибиотиков в большинстве стран Европы преобладает в ветеринарной медицине, и для этих стран, на диаграмме, можно увидеть, что в странах центральной и южной Европы большая часть используется в сельском хозяйстве, в то время как в нордических странах, большая часть антибиотиков используется для людей, а меньшая — для животных (за исключением Дании, где большая часть антибиотиков применяется в сельском хозяйстве). Если мы подумаем об аквакультуре, какие виды антибиотиков используются, можем ли мы сказать о числе антибиотиков? В Финляндии одобрены к использованию в аквакультуре 3 препарата: это окситетрациклин (бактериостатик широкого спектра действия). Снизу справа есть картинка, показывающая разницу между бактериостатиком и бактерицидом. На верхних пластинках у нас есть несколько бактерий слева и спустя несколько дней инкубационного периода, бактерия делится, размножается, увеличивается количество бактерий. Если мы добавим бактерицидный антибиотик, то он убьет все бактерии. Это бактерицидный антибиотик (повтор). Если мы добавим антибиотик-бактериостатик, то он не убьет бактерии, а бактерия перестанет расти или, возможно, продолжит, станет больше, но не будет делиться. То есть не увеличится кол-во бактерий, оно останется тем же. В этом и заключается разница между бактерицидом и бактериостатиком. Окситетрациклин — бакатериостатик. Тем временем, триметоприм/сульфадиазин является тоже антибиотиком широкого спектра действия, но он бактерицидный. Данный антибиотик убьёт бактерию. И флорфеникол тоже является бактериостатиком, как и окситетрациклин. Эти три антибиотика одобрены и используются в аквакультуре Финляндии. Мы также раньше использовали оксолиновую кислоту, но в 2002-2003 был введен запрет и более не используется. Но оксолиновая кислота используется в других странах. Я думаю, она используется в Дании.
Если мы сравним Финляндию с другими странами, то мы увидим, что, например Вьетнам использует множество антибиотиков, 30/39 (зависит от источника. Некоторые указывают о 30, другие о 39). Все равно очень много антибиотиков используется во Вьетнаме. В Чили от 6 до 19 антибиотиков, В Южной Корее — 17, в Китае тоже довольно-таки много, от 13 до 33 различных антибиотиков. В других странах, таких как США, Великобритания, Бразилия, FAO (продовольственная и сельскохозяйственная организация ООН), в Норвегии используется от 2 до 6 антибиотиков. Дозировка использования в разных странах, сильно варьируется. Несколько старых цифр 1994 года, например, в Норвегии. Норвегия использовала 1 грамм антибиотика на тонну произведенной рыбы. В сравнении, например, с Вьетнамом, который использовал 700 гр/т произведенной рыбы.
Антибиотики могут быть введены по-разному: вместе с кормом (наиболее распространенный), в воду (антибиотик добавлен в воду) и рыба плавает в растворе антибиотика, и для выводка может быть инъекция. В рыбу вводят антибиотик.
Инъекция используется для небольшого количества рыбы. Большая часть антибиотика поступает вместе с кормом. В основном дается мелкой рыбе, от 1 до 300 грамм. Давать антибиотик крупной рыбе, которая ест большое количество корма, экономически невыгодно. Корма, содержащие антибиотики, могут быть получены промышленным путём или произведены фермером (у них есть корм, есть антибиотик, и они смешивают их и дают рыбе).
Главная задача антибиотика — убить бактерию. Но у антибиотиков также есть побочные эффекты, как и у всех химических веществ. Побочные эффекты вы видите здесь: например, окситетрациклин оказывает иммунодепрессивное воздействие на рыб, сокращая количество клеток, вырабатывающих антитела. Окситетрацикоин и оксолиновая кислота ингибируют пролиферацию лимфоцитов. И неспецифический иммунный ответ вызывает флорфеникол и оксолиновая кислота.
Мы видим, что у антибиотиков могут быть побочные эффекты, в основном влияющие на иммунную систему различными путями. У разных антибиотиков различная биодоступность. Это значит поглощение антибиотика, поступающего через корм, корм перемещается в кишечник и, затем, антибиотик вырывается из кишечника. Но всего лишь часть антибиотика абсорбируется, остальная уходит. Например, окситотетрациклин отличается низкой биодоступностью. Около 10% растворяется в пресной воде и 5% в морской. В сравнении, флорфеникол обладает хорошей биодоступностью, 95%. То есть 95% антибиотика в корме абсорбируется, а 5% уходит. Сульфадиазин обладает биодоступностью около 40% и триметоприм около 100% (весь антибиотик абсорбируется).
После приема рыбой корма с антибиотиком, начинается отрезок времени, который называется периодом выведения средств из организма. Это значит, не допустим убой рыбы до окончания выведения средств из организма. Данный период зависит от лекарства и температуры воды. Например, для окситетрациклина это 500 градусо-дней. Это значит, если температура 10 градусов, то рыбу нельзя забивать 50 дней. Если температура в воде 20 градусов, то тогда 25 дней. Довольно длительный период, особенно для триметоприма/сульфадиазина — 800 градусо-дней, в сравнении с тем же флорфениколом — 135 градусо-дней. Если температура 10 градусов, то период выведения из организма 13,5 дней.
Данные препараты редко обнаруживаются в финской рыбе, так как разводчики очень бережно относятся к этому. Власти часто берут пробы рыбы, что проверить, будут ли обнаружены антибиотики, но это происходит нечасто. В то время как в других странах, таких как Вьетнам, могут возникнуть серьезные проблемы. Наличие следов антибиотиков в рыбе может привести к отказу стран-экспортеров от поставок. Вьетнам экспортирует довольно много из того, что они производят. И если власти тех стран, куда рыба идет на экспорт, обнаружат следы антибиотиков рыбе, то вся партия бракуется и отправляется обратно во Вьетнам. Около 3500 партий из Вьетнама было забраковано странами-экспортерами (США, Австралией, Японией и ЕС) в период с 2002 по 2010 годы. Это очень много.
Влияние антибиотиков на окружающую среду
Что же происходит, когда рыбе дают антибиотик, что происходит с ним тоже? Я уже упоминал, что только часть антибиотика абсорбируется, и рыба находится в зависимости от антибиотиков.
Но определенное количество антибиотика выводится из рыбы непосредственно в окружающую среду с калом и мочой. В том числе и не съеденный корм, если рыба больна и не ест много, то несъеденный корм так же попадает в окружающую среду. В окружающую среду недалеко от рыбных хозяйств. До 70% антибиотиков могут попасть в окружающую среду. Эти антибиотики буду влиять на окружение, оседающие антибиотики изменяют бактериальные сообщества, позволяя выжить лишь устойчивым к антибиотикам видам бактерий.
На изоражении мы видим, что из резервуаров, находящихся справа, антибиотики, устойчивые к антибиотикам гены, плазмиды, а также резистентные к антибиотикам бактерии. Эти три компонента: антибиотики, резистентные к антибиотикам бактерии, устойчивые к антибиотикам гены (есть различия между генами и бактериями) попадают в окружающую среду и привнесут негативный эффект. Они буду производить резистентные к антибиотикам бактерии в окружающей среде, в виде осадков. А после, с водой, возвращаться снова в рыбные хозяйства и заново использоваться.
Также, когда мы размышляем о других негативных последствиях антибиотиков, значит какой вид стресса они провоцируют на окружающую среду. Остатки антибиотиков в водной среде, в том числе и в дикой рыбе, близкой к рыбным хозяйствам. Так же антибиотики могут абсорбироваться, если они абсорбируются в рыбе, то после передадутся человеку. У человека антибиотики могут вызвать аллергические реакции, хроническую интоксикацию, вызывающую поражение органов у человека и животных и, также, развитие резистентности к антибиотикам у клинически значимых патогенов, патогенов, поражающих человека. Также сотрудники рыбных хозяйств подвергаются воздействию антибиотиков из-за кормовых антибиотиков-аэрозолей.
Какой же стресс окажут антибиотики на акватическую среду? Конечно же развитие резистентности к антибиотикам у зоонозных патогенов бактерий. Что это значит? Это возбудители заболеваний, поражающих и животных, и к человеку. И также передающихся от животных, может быть и от рыб, но чаще от других животных к человеку. Например, Aeromoas hydrophila и такой патоген, как негемолитический стрептококк. Так же будет повышение распространенности устойчивых к антибиотикам генам (мы снова возвращаемся к разнице между устойчивыми к антибиотикам бактериям и генам). Гены передаются из бактерии в окружающую среду, к другим разным бактериям. Устойчивые к антибиотикам гены могут присутствовать в нормальной бактериальной флоре, осадочных отложениях или воде. Например, устойчивые к сульфонамиду и триметоприму гены были обнаружены в осадочных отложениях, недалеко от рыбных хозяйств Балтийского моря. Но только там, в дали от рыбных ферм, эти гены обнаружены не были. Мы должны помнить, что гены могут быть в других бактериях, не только в рыбных бактериях, но также в бактериях окружающей среды. Гены законсервированы (хранятся) в бактериях и могут передаваться дальше. Так же устойчивые к кситетрациклину, флорфениколу и оксолиновой кислоте бактерии были обнаружены в осадочных отложениях недалеко от рыбных хозяйств в Чили, где используется огромное количество антибиотиков.
Антибиотики также могут оказывать токсическое воздействие на дикие, нецелевые виды. Это значит, что антибиотики, для которых целью является бактерия, попадает в окружающую среду и повлияют на многообразие фитопланктона и зоопланктона, соответственно многообразие будет меняться посредством бактериальной интоксикации. Бактерия отравляет, а зоопланктон или фитопланктон, давайте скажем так, зоопланктон и фитопланктон зависимы от определенных бактерий, на которые антибиотик повлияет. Также нарушение раннего развития зоопланктона (когда зоопланктон развивается из яйца, а антибиотик влияет на стадию развития) и нарушение производства хлорофилла фитопланктоном. Антибиотик вызывает изменения в пищевых цепочках, а когда происходят изменения в пищевых цепочках, тогда это имеет последствия для всей экосистемы. Все поменяется. Известно негативное воздействие антибиотиков в сочетании с иммунодепрессией на организмы и изменениями кишечной микробиоты организмов. Я ранее упоминал о кишечной микробиоте человека, что она очень важна и что антибиотики влияют на нее. Возможность развития устойчивых к мультимикробным препаратам бактерий. Это одна из самых главных проблем — мультирезистентная бактерия.
По мнению ВОЗ, устойчивость к антибиотикам станет одной из самых серьезных угроз для человека в ближайшие 20-30 лет. В ближайшем будущем не останется методов лечения простых бактериальных инфекций из-за наличия у бактерий, вызывающих такие инфекции, резистентности к антибиотикам. Это значит, что нам нужно уменьшать использование антибиотиков., для людей, для животных и для рыбы. По поводу резистентности к антибиотикам. Резистентность к антибиотикам — это наследственная способность бактерии выживать и размножаться при наличии высокой концентрации антибиотиков. Но это определение не самое понятное, потому что, например, что обозначает «высокая концентрация антибиотиков»?
Как определяется чувствительность или резистентность к антибиотикам? Вам нужно иметь чистую культуру бактерии и один из методов — диско-диффузионный метод (ДДМ). У нас есть картинка ДДМ, что значит, что Вам нужная твердая питательная среда агара и Вы помещаете туда бактерию, в полностью сухую среду. Затем добавляете таблетки, содержащие антибиотики, прямо на пластину. На пластине бактерии выращивают при определенной температуре в течение определённого времени. После инкубационного периода, Вы измеряете замедление роста бактерий. Вокруг каждой таблетки, в которой содержится антибиотик. Антибиотик из таблетки рассеивается в среде и у нас появляется градиент концентрации. Если концентрация высокая — таблетка рядом, а дальше идет на понижение.
Если бактерия чувствительная к антибиотику, то она не будет расти рядом с таблеткой. Затем формируется зона, свободная от бактерий зона вокруг таблетки, и мы замеряем эту зону. Полученные значения сравнивают со стандартными значениями для каждого антибиотика. После этого сравнения Вы определяете, обладает ли бактерия высокой, промежуточной или устойчивой чувствительностью в зависимости от степени замедления роста. Измерение зоны замедления роста очень важно!
Так же есть еще один используемый метод. Когда у нас есть большое количество штаммов в Вашей коллекции или Вы замерили большое количество штаммов, вам нужно определить, какую концентрацию Вы имеете в замеренной зоне замедления роста. Какая концентрация или какое количество в зоне представляют дикие виды. Потому что у нас всегда есть вариации измерений, в зависимости от штаммов бактерий. Затем мы определяем, что есть норма.
На изображении справа у нас представлены 3 популяции бактерий, демонстрирующие разные зоны замедленного роста в диаметре. В популяции справа (черные столбцы) признан диким типом, и вариации дикого типа составляют от 23 до 33 мм. Каждое измерение Вашего нового бактериального изолята должно находится в пределах 23-33 мм, что считается нормой и что штамм чувствителен. У Вас есть ограничение в 23 мм. Также у нас есть 2 других популяции, слева, где диаметр замедленного роста меньше, короче, от 12 до 20 (это значит, что изолят резистентный). И другая популяция, с еще более меньшей зоной замедленного роста от 6 до 9 мм. И где-то между 20 и 23 мм зона, называющаяся промежуточной. Если Ваш новый изолят, Ваш новый штамм имеет зону замедленного роста для каждого антибиотика (это делается для каждого антибиотика), например 12 мм — то он является резистентным.
Каким образом развивается резистентность? Она развивается произвольно или нам есть что сказать об этом? Есть два разных пути развития резистентности. Первый это естественные мутации, мутации в геноме бактерии, которые делают бактериальную клетку менее чувствительной к определенному антибиотику. Другой путь — это передача детерминантов резистентности (подвижные резистентные элементы) из резистентной бактерии в чувствительную клетку.
Таким образом, детерминанты резистентности передаются от одной бактерии к другой.
Эти подвижные резистентные элементы содержат гены резистентности. Элементы способны перемещаться внутри генома бактерии, и также могут перемещаться из одной бактерии в другую, от одного вида к другому. Содержат плазмиды, транспозоны и элементы бактериофагов и т. д. Каков же механизм работы ПРЭ в генах резситентности, какие пути? Они могут ферментативно модифицировать или инактивировать антибиотик. Когда антибиотик попадет в клетку, бактерия вырабатывает ферменты, разрушающие антибиотик, и он более не работает. Могут происходить изменения целевых или связывающих участков антибиотика (когда антибиотик проникает в клетку, он должен соединиться с определёнными компонентами в бактерии, и эти компоненты, эта целевая связь может быть изменена бактерией. Антибиотик не может ее найти и поэтому от него не последует эффекта.
Могут быть изменения в метаболических путях. У нас есть метаболический путь, на который влияет антибиотик, но когда бактерия меняет путь, обходит его, то антибиотик снова неэффективен. Когда антибиотик попадает в бактерию, то она может использовать эффективные насосы. Насосы, которые откачивают антибиотик, и у антибиотика нет времени повлиять на бактерию. Только зашёл — сразу откачан. И снижение проницаемости клетки для антибиотика (когда антибиотик пытается проникнуть в клетку, но клетка вырабатывает, например, белок и антибиотика не может проникнуть внутрь, а остается снаружи. Бактерия будет являться резистентной. Я говорил уже вам, что гены могут перемещаться из одной бактерии в другую, и это называется горизонтальным переносом генов или также называется латеральным переносом генов.
Это обозначает что гены перемещаются из одной клетки в другую и это происходит в трех вариантах:
- Трансформация (бактерия выпускает гены ДНК или фрагменты в окружающую среду, а другая бактерия находит эти гены в окружающей среде и подбирает их).
- Другой вариант — трансдукция, это значит, что бактериофаги перемещают гены из одной бактерии в другую, с помощью бактериофагов. И это является проблемой, в следующей лекции я расскажу о бактериофагах. Бактериофаги используется для лечения болезней, бактериофаги не должны содержать в себе гены антибиотика.
- Третий путь — конъюгация с помощью плазмид. Это значит, что две бактерии находятся рядом с друг другом, формируется мост между ними и плазмиды переходят и одной бактерии в другую.
Благодаря горизонтальному переносу генов, большое количество генов резистентности может собираться вместе в одной бактерии или подвижном резистентном элементе, вызывая кое-что, под названием мультирезистентность. И это большая проблема. Одна из самых больших проблем, которые имеются.
Если у нас есть бактерия, которая является мультирезистентной, то она резистентная к нескольким видам антибиотиков. Источником генов резистентности, я уже об этом говорил, является природа, потому что в природе бактерия появляется естественным образом.
Она естественным образом вырабатывает устойчивость к антибиотику, антибиотику естественного происхождения. Они довольно распространены в наземной и акватической среде. Антибиотики, попадая в природу дают преимущество бактерии, и это означает, что бактерии содержат в себе резистентные, естественно резистентные гены и они могут формировать огромные популяции. В некоторых средах обитания существует крупномасштабный (длительный) контакт, между естественными (природными) бактериями, которые являются продуцентам антибиотиков, и также бактериями из антропогенных источников (очистные сооружения сточных вод, животноводство, с/х итд). Вес это является идеальной средой для распространений детерминант резистентности и развития мультирезистентности в богатых питательными веществами, условиях. Это очень важно, что именно богатая питательная среда, бактерии нужно много питательных веществ, чтобы расти и переносить резистентных детерминантов.
Устойчивость к противомикробным препаратам
Что же, теперь мы перейдем к теме болезней в аквакультуре. И, в общем, можно сказать, что устойчивость к различным антибиотикам наблюдается у большинства бактериальных патогенов рыб.
Например, устойчивость бактериальных патогенов рыб к оксолиновой кислоте широко распространена в Финляндии, хотя ее использование (оксолиновой кислоты) было прекращено в 2003 году. Это значит, что гены резистентности сохранились в патогенах, хотя никакого на них давления на них больше не оказывается (оксолиновой кислотой, имеется ввиду, так как она более не используется).
Антибиотикотерапия различных заболеваний рыб
Как контролировать вибриоз? Для борьбы с вибриозом используется несколько разных антибиотиков, таких как окситетрациклин, тетрациклин, фторохинолоны, потенцированные сульфаниламиды, триметоприм, флумекин, оксолиновая кислота, флорфеникол. Лекарства, выбранные на сегодня, это окситетрациклин, флорфеникол и энрофлоксацин. Окситетрациклин и флорфеникол используются в Финляндии, но не энрофлоксацин. Количество и время зависит от вида антибиотика, который будет использован. Вот несколько вариантов. Говоря о вибриозе, резистентность к антибиотикам возрастает, а особые трудности представляет появление мультирезистентных штаммов. Например, 74% выделенных вибрионов из аквакультуры в Австралии оказались устойчивыми, по крайней мере, к одному антибиотику. Устойчивость к окситетрациклину и бета-лактаму была обнаружена в аквакультуре креветок во многих-многих странах. Необходимо экстренное сокращение применения антибиотика в аквакультурах и в приоритете альтернативные методы лечения.
Фурункулез, Aeromonas salmonicida. Антибиотики против Aeromonas salmonicida в наше время используется для не вакцинированной рыбы. Большая часть лососевой рыбы Финляндии и других странах вакцинирована против данной болезни. Но иногда встречаются популяции в хозяйствах, которые не вакцинированы и довольно-таки быстро происходит инфицирование Aeromonas salmonicida. Безусловно, используются антибиотики. В основном это тетрациклин, триметоприм/сульфа и флорфеникол. Резистентность к различным антибиотикам широко распространена у Aeromonas salmonicida, это значит, что Aeromonas salmonicida собирает гены резистентности довольно часто. В 2017 году резистентность у одного изолята ко всем антибиотикам, применяемы в Финляндии, была выявлена у штамма, изолированного из не вакцинированной радужной форели, в области недалеко от Турку. Этот штамм был резистентен к флорфениколу, окситетрациклину, трим/сульфе + даже к оксолиновой кислоте.
И справа Вы можете увидеть изображение этого штамма, и там почти нет зон вокруг таблеток, добавленных на пластину. Мы думаем, что эта резистентность была вызвана мультирезистентной плазмидой, довольно-таки большой плазмидой, около 200 килобайт, где есть область множественной лекарственной устойчивостью (на нижней картинке, слева. Область с множественной лекарственной устойчивостью содержит в себе гены против нескольких разных антибиотиков. Этот пример, показывает, что плазмида, которая здесь на картинке, может отличаться от той, которую мы изолировали в Финляндии, но может быть схожей. Но плазмида с картинки произошла из бактерии Salmonella enterica, обозначающая бактерию, которая не поражает на рыбу. То есть у нас была плазмида в бактерии, поражающая других животных, и эта плазмида переместилась в патоген рыбы, создав проблемы у выращиваемой рыбы. У Aeromonas salmonicida было идентифицировано несколько плазмид различного размера. Размер плазмид от небольших 5000 п.о до больших 150 т. п. о. Как я сказал, одна плазмида может содержать в себе несколько антимикробных генов резистентности. Эти гены также могут быть перемещены из человеческих патогенов, также из рыбных патогенов в человеческие патогены. Путь перемещения продемонстрирован на картинке справа.
Перейдем к Renibacterium Salmoninarium. Антибиотикотерапия против этой бактерии, вызывающей бактериальную почечную болезнь, была опробована с эритромицином. 100мгм на 1 кг веса тела в течение 28 дней, довольно-таки продолжительное время, потому что этот патоген внутриклеточный и антибиотику требуется долгое время, чтобы достичь клетки, проникнуть в нее и убить бактерию. Но лечение не эффективное, из-за внутриклеточного размещения патогена и было зарегистрирована резистентность к эритромицину, и к разным макролидам. Хотя эритромицин используется и дает некоторый эффект, но нет прямого назначения антибиотиков для лечения этой болезни. Это очень проблематичная болезнь, так как нет антибиотиков, которые можно было бы использовать.
Поговорим о Pseudomonas anguilliseptica. Обычно чувствителен к антибиотикам, иногда резистентен к трим/сульфа. Исследовался также в нашей лаборатории и особенно чувствителен к окситетрациклину и флорфениколу, к флорфениколу даже больше. Флорфеникол нормально работает и чаще всего используется против этого патогена.
У нас есть проблема с Flavobacterium psychrophilum, так как нет вакцины и патоген естественным образом резистентен к трим/сульфа, окситотетрациклин недостаточно эффективен. Окситетрациклин не используется для бактерии, хотя возбудитель не является резистентным. Что используется, так это флорфеникол, и он высокоэффективен в Финляндии и с ним не возникает проблем, но резистентность наблюдается в Чили и в Турции; в Чили особенно высок уровень резистентности к флорфениколу. Это вызывает волнение, потому что если резистентность пойдет дальше по всему миру, в разные страны, то у нас не будет возможности лечить Flavobacterium psychrophilum. Гены резистентности исследованные в Aeromonas salmonicida тоже являются проблемой, потому что такая резистентность может быть перемещена во Flavobacterium psychrophilum. Другая проблема — лечение при низких температурах, потому что чаще всего болезнь проявляется при температуре ниже 10 градусов, иногда 4 градусов тепла. При такой температуре, потребление рыбой пищи очень низкое, и это значит, что очень сложно дать антибиотик рыбе. Возможно использование формалиновых ванн против данного патогена, но лечение обладает кратковременным эффектом, так как формалин негативно влияет на эпидермис с отрицательным исходом. Значит что эпидермис открыт и появляется много возможностей для Flavobacterium и других патогенов, инфицировать рыбу.
Перейдем к Yersenia ruckeri. Несколько различных антибиотиков использовалось, таких как амоксициллин, оксолиновая кислота, окситетрацикли, трим/сульфадиазин и флорфеникол. Используются по всему миру, не только в Финляндии. Некоторые американские изоляты устойчивы к тетрациклинам и сульфаниламидам. И также у нас была обнаружена резистентность к флорфениколу и это вызывает беспокойство.
Pisciricketsia salmonis, которой нет в Финляндии и не часто встречается в Европе. Патоген чувствителен к различным антибиотикам in vitro (в лаборатории), но у зараженных в хозяйствах рыбах отмечается слабая реакция, хотя патоген редко обладает резистентностью. Патоген чувствителен, но он тоже внутриклеточный и его непросто лечить. Антибиотики рекомендуется давать в течение 21 дня. В Чили огромное количество тетрациклина использовалась против этой болезни, и вскоре тетрациклин потерял свою эффективность. Он больше не действует. В нескольких патогенах была обнаружена резистентность из-за огромного количества используемого окситетрациклина и тетрациклина. В настоящее время широко используется флорфеникол, а резистентность Pisciricketsia salmonis к данному антибиотику не исследована.
Перейдя к заключениям, нужно отметить, что аквакультура должна поставить целью использование меньшего числа антибиотиков настолько, насколько это возможно. Во всех рыбоводных хозяйствах должны быть приняты эффективные стратегии управления, направленные на минимизацию применения антибиотиков; разведение «качественной рыбы», снижение плотности стад, создание хороших условий содержания и т. д. Важно выявлять патогены, вызывающие заболевание и проводить соответствующую антибиотикограмму для всех патогенов, до или во время антибиотикотерапии рыбы во всех рыбных хозяйствах. Важно следить за кривой чувствительности (антибиотикграммой) ко всем используемым антибиотикам, чтобы Вы видели, что чувствительность патогена в определенной местности или рыбном хозяйстве, уменьшается. Если уменьшение слишком велико, то бактерия станет резистентной. Касается определённых географический областей и должно выполняться местными ветеринарными органами. Следует отказаться от перемещения рыбы с ранее диагностированными устойчивыми к антибиотикам патогенами. Они должны быть полностью подавлены.
Д-р Том Виклунд, заведующий лабораторией водной патобиологии, доцент кафедры патологии рыб Академии Або, Финляндия. Лекция проведена в рамках курса «Бактериальные болезни лососевых рыб».
